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《当前细胞术方案》和《当前免疫学方案》是“最佳实践”的集合，提炼和组织了流式细胞术和图像细胞术以及免疫学方法的同行评审方案技术。
普渡大学流式细胞术讨论列表是一个讨论流式细胞术许多方面的有价值的论坛，它拥有国际追随者。人们可以搜索讨论档案。要订阅讨论，请访问这个网站。要向该组发送电子邮件，请发送电子邮件至cytometry@lists.purdue.edu。
荧光光谱观察器
抗体交叉反应性资源
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我们希望在每个人自己使用仪器之前，先让他们了解GCC设备协议和程序。
如何安排仪器的使用？
所有分析仪和Miltenyi Tyto的调度使用iLab （Agilent CrossLab）完成，这是一个基于网络的电子日历。
对于分类，新用户必须首先联系设施人员（flow@augusta.edu）。他们将确定您的排序目标的可行性，提供与排序单元格相关的指导方针，并为您创建排序预约。
染料X可以在工厂运行吗？染料X和染料Y可以一起使用吗？
要检查染料的兼容性，请访问流式细胞术页面查看仪器配置。如需小组规划协助，请参阅上面的兴趣链接部分或发送电子邮件flow@augusta.edu寻求帮助。
多长时间从计算机中删除一次数据文件？
不允许在实验室的计算机上存储任何数据文件。运行样品后，数据文件应立即转移到BOX。你的数据和实验最终是你自己的责任。
流式细胞仪可以检测什么类型的样品？
可以分析任何单个细胞或单个颗粒悬浮液。所有样品在机器上运行前必须过滤。如果您的样品容易结块（粘附细胞，肿瘤等），过滤可能还不够，您需要添加额外的添加剂（DNAse， EDTA， Accutase等）来防止结块。
我应该带什么样品进来？
用于分析，样品可以带入12 x 75毫米圆底聚丙烯管，epppendorf管或标准尺寸的培养板。分选时，样品应装入附注管、12 × 75圆底聚丙烯管或15mL锥形管。
我可以运行具有潜在传染性（生物危害）的标本吗？
主要共享资源实验室（CN 4158C）目前可容纳生物危险标本，最高可达BSL1。请与核心人员讨论未固定样品的可能性。由于生物安全级别，所有使用者必须佩戴适当的PPE（实验室工作服、手套和安全护目镜）。门外有备用的实验服以备不时之需。标本在进入设施之前应灭活所有病原体。请咨询我们推荐的固定技术。分选机（ThermoFisher Bigfoot），安置在不同的区域（CN 4146C），可以处理高达BSL2+。本工具目前仅作为一项服务提供使用。详情请联系我们（flow@augusta.edu）。
在进行多色流式细胞分析时，分析成功的一个主要因素是选择哪种抗体与哪种荧光染料一起使用。通常有许多可能的正确组合。在做选择时需要考虑许多因素。
下图显示了与12种常用荧光染料偶联的同一单克隆抗体的染色模式。这张图表详细说明了在不同的荧光团之间观察到的巨大差异；它可以作为在核心细胞仪上运行的各种荧光团的相对强度的指导。
另一个伟大的荧光亮度图表和整体多色实验设置参考可以在这个BD生物科学应用笔记中找到。
本文档提供了更多关于常用荧光团的详细信息。
自体荧光是基础研究流式细胞术环境中的一个主要关注点，如果不认识到细胞自体荧光所起的作用，任何关于荧光团的章节都不能被认为是完整的。
单个细胞群具有特征水平的自身荧光（由细胞自身产生的荧光信号）。哺乳动物细胞的自身荧光，至少在淋巴细胞中，主要来自吡啶和黄素核苷酸。吡啶核苷酸在紫外光（~340 nm）下激发效率最高，在450-470 nm蓝光范围内有最大发射。黄素核苷酸是流式细胞术实验室的主要问题，因为这些分子在色谱的蓝绿色范围（430-500 nm）内被激发，这是流式细胞仪的主要激光器发射光（488 nm）的地方。在激发时，黄素核苷酸的发射范围（530- 550nm）与FITC/eGFP（绿色）、PE（橙色）以及PE- cy5 /PerCP（红色）和PE- cy7（远红色）的发射范围相同。关键信息是，虽然在所有荧光通道中都可以观察到自体荧光，但在较长的波长（约600纳米）下，它会急剧减少。
有关自动荧光的更多信息，请参阅本参考资料：自动荧光
